Barbie: Spy Squad theo chân cô nàng Barbie cùng nhóm bạn thân thiết bất ngờ được một tổ chức điệp viên công nghệ cao chiêu mộ. Từ những thiếu nữ năng động bình thường, họ được huấn luyện bài bản để nhanh chóng chuyển mình thành các đặc vụ ngầm tinh nhuệ. Nhiệm vụ trọng tâm của đội ngũ đặc nhiệm trẻ tuổi là ngăn chặn hành vi của một tên trộm mèo vô cùng ma mãnh và xảo quyệt. Nhóm bạn phải tận dụng tối đa kỹ năng thể dục dụng cụ khéo léo kết hợp các trang thiết bị hiện đại để lần theo dấu vết tội phạm và đối mặt với hàng loạt thử thách hiểm nguy trên đường tác chiến. Tác phẩm hoạt hình phiêu lưu này thuộc nền điện ảnh Âu Mỹ với thời lượng 1 giờ 15 phút, tập trung vào những cuộc rượt đuổi sôi nổi và tinh thần đồng đội ăn ý.