Tiểu Thư Không Chơi Game Đối Kháng xoay quanh Mitsuki Aya khi cô vừa bước chân vào Học viện Nữ sinh Kuromi danh giá. Động lực duy nhất của Aya là rèn luyện bản thân để trở thành một tiểu thư thanh lịch, lấy hình mẫu lý tưởng từ Yorue Mio, người được tôn xưng với danh hiệu Hoa Ly Trắng hoàn hảo của toàn trường. Mọi hình dung đẹp đẽ của Aya sụp đổ hoàn toàn khi cô vô tình phát hiện bí mật đằng sau vẻ ngoài thanh tao của Mio: một game thủ cày các tựa game đối kháng hạng nặng. Không ngần ngại che giấu sau khi bị bắt gặp, Mio lập tức đưa ra lời thách đấu trực tiếp với Aya, khởi đầu cho những trận đấu nảy lửa cùng mối quan hệ bạn bè đặc biệt giữa hai người. Bộ phim hoạt hình học đường hài hước của Nhật Bản gồm 12 tập với độ dài 22 phút mỗi tập. Dàn nhân vật được thể hiện bởi các diễn viên như Ikumi Hasegawa, Yumiri Hanamori, Kana Ichinose, Maria Naganawa, Yohei Azakami và Taku Yashiro.